Будучи высокоточным инструментом, ВЭЖХ может легко привести к некоторым неприятным небольшим проблемам, если во время использования с ним не будут правильно работать.Одной из наиболее распространенных проблем является проблема сжатия столбцов.Как быстро устранить неисправность хроматографа.Система ВЭЖХ в основном состоит из резервуара-резервуара, насоса, инжектора, колонки, температурной камеры колонки, детектора и системы обработки данных.Для всей системы колонны, насосы и детекторы являются ключевыми компонентами и основными местами, в которых могут возникнуть проблемы.
Ключом к давлению в колонке является та область, которая требует пристального внимания при использовании ВЭЖХ.Стабильность давления в колонке тесно связана с формой хроматографического пика, эффективностью колонки, эффективностью разделения и временем удерживания.Стабильность давления в колонке не означает, что значение давления стабильно на стабильном уровне, а означает, что диапазон колебаний давления находится в пределах 345 кПа или 50 фунтов на квадратный дюйм (что позволяет использовать градиентное элюирование, когда давление в колонке стабильно и медленно меняется).Слишком высокое или слишком низкое давление является проблемой давления в колонке.
Наиболее подвержены сбоям и решениям ВЭЖХ
1, высокое давление является наиболее распространенной проблемой при использовании ВЭЖХ.Это означает резкое повышение давления.В целом существуют следующие причины: (1) Как правило, это происходит из-за закупорки проточного канала.На этом этапе нам следует рассмотреть его по частям.а.Сначала отрезаем входное отверстие вакуумного насоса.На этом этапе трубка из ПЭЭК была заполнена жидкостью так, чтобы трубка из ПЭЭК была меньше бутылки с растворителем, чтобы можно было проверить, капает ли жидкость произвольно.Если жидкость не капает или капает медленно, головка фильтра растворителя заблокирована.Лечение: замочить в 30% азотной кислоте на полчаса и промыть сверхчистой водой.Если жидкость капает беспорядочно, головка фильтра растворителя исправна и подлежит проверке;б.Откройте клапан продувки, чтобы подвижная фаза не проходила через колонку, а если давление значительно не снизится, белая головка фильтра засорится.Лечение: Отфильтрованные белые точки удаляли и обрабатывали ультразвуком 10%-ным изопропанолом в течение получаса.Если предположить, что давление упадет ниже 100 фунтов на квадратный дюйм, отфильтрованная белая пена в норме и подлежит проверке;в.Удалите выходной конец колонки, если давление не снижается, колонка заблокирована.Лечение: Если это засорение буферной солью, промывайте 95%, пока давление не станет нормальным.Если препятствие вызвано каким-то более хорошо сохранившимся материалом, следует использовать более сильный поток, чем текущая подвижная фаза, чтобы достичь нормального давления.Если давление длительной очистки не снижается по вышеописанному методу, вход и выход колонки, наоборот, можно считать соединенными с прибором, и колонку можно очищать подвижной фазой.В настоящее время, если давление в колонне все еще не снижено, входную ситовую пластину колонны можно только заменить, но если работа неудовлетворительна, это легко приведет к уменьшению эффекта колонны, поэтому старайтесь использовать меньше.В случае возникновения сложных проблем можно рассмотреть возможность замены колонки.
(2) Неправильная настройка расхода: Правильный расход можно сбросить.
(3) Неправильное соотношение потоков: индекс вязкости различных пропорций потоков различен, и соответствующее давление в системе потока с более высокой вязкостью также больше.Если возможно, растворители с более низкой вязкостью можно заменить или повторно настроить и подготовить.
(4) Дрейф нуля давления в системе: отрегулируйте ноль датчика уровня жидкости.
2, давление слишком низкое (1), как правило, вызвано утечкой в системе.Что делать: Найдите каждое соединение, особенно интерфейс на обоих концах колонны, и затяните места утечки.Снимите стойку и затяните или выровняйте пленку из ПТФЭ с соответствующей силой.
(2) Газ поступает в насос, но давление в это время обычно нестабильно, то высокое, то низкое.А если серьезно, насос не сможет всасывать жидкость.Метод обработки: откройте клапан очистки и очистите со скоростью потока 3–5 мл/мин.В противном случае пузырьки воздуха отсасывались из выпускного клапана с помощью специальной игольной трубки.
(3) Нет вытекания подвижной фазы: проверьте, есть ли подвижная фаза в резервуаре, погружена ли раковина в подвижную фазу и работает ли насос.
(4) Контрольный клапан не закрыт: контрольный клапан закрывается после замедления.Обычно оно снижается до 0,1.~ 0,2 мл/мин после закрытия контрольного клапана.
Краткое содержание:
В данной статье анализируются только общие проблемы жидкостной хроматографии.Конечно, в нашем практическом применении мы столкнемся и с другими проблемами.При обработке ошибок мы должны следовать следующим принципам: изменять только один фактор за раз, чтобы определить взаимосвязь между гипотетическим фактором и проблемой;Как правило, при замене деталей для устранения неполадок мы должны уделять внимание тому, чтобы демонтированные неповрежденные детали были возвращены на место, чтобы предотвратить отходы;Формирование хорошей привычки вести запись является ключом к успеху в устранении ошибок.В заключение, при использовании ВЭЖХ важно уделять внимание предварительной обработке проб, а также правильной эксплуатации и техническому обслуживанию оборудования.
Время публикации: 18 сентября 2023 г.