Химическая устойчивость пептидов зависит от состава и последовательности аминокислот. Лиофилизированные пептиды, как правило, более долговечны, чем их аналоги в растворе. Потенциальные методы деградации пептидов следующие:
1, Гидролиз: это обычно включается в ASP в последовательности (D) для проблемы в пептиде очень легко обезвожен для образования промежуточного звена имида кольца. Например, в последовательности есть ASP. -Pro (DP) В этом случае промежуточный имид в форме кольца, продуцируемый кислотным катализом, приведет к расщеплению пептидной цепи. Аналогичным образом, ASP-Gly (DG) присутствует в последовательности, и в этом случае круговое промежуточное соединение может быть гидролизовано в исходный режим ASP изоаспарсиновой кислоты (безвредной) или потенциально неактивный аналог. Наконец, все паттерны аспарагиновой кислоты могут быть полностью преобразованы в аналоги изоспарсиновой кислоты. «На меньшем уровне он содержит SER (S), последовательность, которая также образует круговой промежуточный imide, который в конечном итоге очищает пептидную цепь».
2, Deamidation: эта базовая катализируемая реакция часто возникает в присутствии ASN-Gly (NG) или GLN-Gly (QG) в последовательности и следует аналогичному механизму последовательности ASP-Gly (DG). Деаминирование (потеря амина) в последовательности ASN-Gly дает циклическое промежуточное звено имид, которое затем гидролизуется для получения аналогов аспарагиновой кислоты ASN или изо всех. Кроме того, промежуточное соединение имид кольца может вызвать D-ASP или внешнее ослабление с ASND-ISO-чем-то, что подобно ASP, все из которых могут быть неактивными.
3, Окисление: CYS и MET остатки являются основными остатками, которые подвергаются обратимому окислению. Окисление цистеина ускоряется при более высоких значениях pH, где тиол более легко удаляет протонирование и подвергается генерированию дисульфидных связей в цепях или между. Дисульфидная связь может быть легко обращена вспять путем лечения дитиотреитолом (DTT) или Tris (2-карбоксилфосфин) гидрохлорид (TCEP). Метионин окисляется химическим и фотохимией для получения диоксида метионина, который дополнительно попадает в диоксид метионина, оба из которых трудно изменить.
4, Дикетопиперазиновый и пироглутаминовая кислота: образование диметилпиперазина обычно происходит, когда Gly находится в третьем положении N-конца, особенно если Pro или Gly находится в положении 1 или 2. Эта реакция включает в себя нуклеофильные атаки N-концевого азота на амид-бензиле между вторыми и третьими аминокислоты, полученные в амиде, а аминокислоты, полученные в амиде-аминоки, воина-аминоиноя аминоинои. Дикетопиперазиновый метод. С другой стороны, если GLN расположен на N-конце, образование пироглутаминовой кислоты почти неизбежно. Это аналогичная реакция, в которой N-концевой азот атаковал углерод с боковой цепью Gln, образуя дезаминирование аналога пироглутамильного пептида. Это преобразование также происходит с N-концом, содержащим аналогов пептидов пироглутамата.
5. Racemization: этот термин широко используется для обозначения общей потери хиральной целостности аминокислоты или пептида. Реймизация включает в себя преобразование аминокислоты из катализируемого основанием энантиомера, обычно L-форма, в тип 1 энантиомеров L и D-формы. : 1. Смесь. Это более важно во время генерации пептидов, но менее проблематично в готовом пептиде. Кроме того, переключатель трудно обнаружить и не может контролироваться.
Общий подход, чтобы избежать или минимизировать деградацию пептидов, состоит в том, чтобы ухудшить пептид до-20 ° C или лучше-80 ° C для лиофилизированного хранилища, если таковые имеются. Если пептид находится в водном растворе, каждый образец аликвоты должен быть заморожен, чтобы избежать замораживания и оттаивания. Следует избегать воздействия PH & GT; Средний 8. Однако, если ph & gt требуется; Если пептид тает на 8, его воздействие должно быть минимальным.
Время сообщения: 2025-07-01