После химического синтеза пептидов с помощью твердофазной FMOC существует множество методов расщепления, и теперь вводится два основных типа, которые мы обычно используем.
1. Сильный кислотный метод (TFA)
Сухая смола была помещена в колбу в коктейль, и было добавлено соответствующее количество содержащихся падальщиков. (Smopengers) Реагент резания трифторуксусной кислоты (TFA), 10-25 мл/г смола, ограниченная и встряхиваемая перерыва при комнатной температуре с вращением. Смолу сливали, промывали 2-3 раза новым TFA, фильтрат объединяли, и в 8-10 раз больше объема ледяного диэтилового эфира был сброшен. Иногда некоторые TFA можно приготовлено на пару, чтобы получить грубые пептидные осадки. Эфир может быть использован для повышения эффективности осадков за счет охлаждения с помощью льда. Наконец, был собран осажденный сырой пептидный продукт.
Подходящая смола: смола Wang или каток амидной смолы
2, метод слабой кислоты (TFA или уксусная кислота) 1% TFA:
1G смолы, содержащие пептиды, добавляли в стеклянную колбу из раствора дихлорметана, содержащую 1%TFA, герметизированную и встряхнутую в течение 2 минут. Фильтрат прижимали азотом в другую новую метанольную колбу, содержащую 10% пиридина, и процедуру повторяли 10 раз. Защитные пептиды, оставшиеся на смоле три раза, с использованием 30 мл DCM и 30 мл MEOH. Остатки проверяли и очищали TLC или ВЭЖХ. Все фильтраты были объединены, а 5% растворителя готовили под уменьшенным давлением. Было добавлено сорок мл воды и осаждали с охлаждающей смесью. После фильтрации продукт трижды промывали чистой водой, помещали в вакуумную сушную духовку и сушили KOH или P2O5.
Разбавить уксусную кислоту:
Пептиды, висящие на смоле, обрабатывали режущим раствором в течение 2 ч, используя ACOH // TFE/DCM (2: 2: 6), смолу отфильтровали, и смолу трижды промывали режущим раствором. Избыток уксусной кислоты удаляли путем добавления 15-кратного N-гексана в смешанный фильтрат и вращение вращения.
Смола приложения: 2-CTC смола
Время сообщения: 2025-07-01